ఉత్పత్తులు

5-ఫ్లోరోరాసిల్ (5-FU) మరియు రెండు ఎండోజెనస్ మోనోఫాస్ఫేట్ న్యూక్లియోటైడ్‌ల యొక్క అనేక జీవక్రియలను ప్రత్యేకంగా లెక్కించడానికి, మేము లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ-టాండమ్ మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ (LC-MS/MS) ఆధారంగా అసలు పద్ధతిని అభివృద్ధి చేసాము.ఈ పరీక్ష వీటిని నిర్ణయించడానికి అనుమతించింది: (i) 5-FU లేదా 5-ఫ్లోరో-2′-డియోక్సియురిడిన్ (5-FdUrd) నుండి 5-ఫ్లోరో-2′-డియోక్సియురిడిన్-5′-మోనోఫాస్ఫేట్ (5-FdUMP) యొక్క కణాంతర ఉత్పత్తి , (ii) కణాంతర 2′-డియోక్సియురిడిన్-5′-మోనోఫాస్ఫేట్ (dUMP)/థైమిడిన్-5′-మోనోఫాస్ఫేట్ (TMP) నిష్పత్తిపై 5-FdUMP గాఢత ప్రభావం, మరియు (iii) 5-FdUMP యొక్క స్రావ పరిధి మరియు ABC ట్రాన్స్‌పోర్టర్‌ల ద్వారా మానవ కల్చర్డ్ కణాల నుండి 5-FU.మా ప్రయోగాత్మక పరిస్థితులలో, కణాలు 5-FU లేదా 5-FUrdతో పొదిగేవి.అప్పుడు, సెల్యులార్ ప్రోటీన్లు మిథనాల్ ద్వారా అవక్షేపించబడ్డాయి.ఈ విధానం అధిక వెలికితీత రికవరీని అందించింది.అదనంగా, కణాల నుండి 5-FU మరియు 5-FdUMP స్రావాన్ని కొలవడానికి, మేము సంస్కృతి మాధ్యమంలో ఈ అణువుల పరిమాణాన్ని నిర్వహించాము.మీడియా నేరుగా ఇంజెక్ట్ చేయబడింది (5-FU) లేదా ఒయాసిస్ వాక్స్ ఎక్స్‌ట్రాక్షన్ కార్ట్రిడ్జ్ (5-FdUMP) ఉపయోగించి ఘన దశ వెలికితీత కిందకు వెళ్లింది.మొబైల్ ఫేజ్‌గా అమ్మోనియం ఫార్మేట్ బఫర్/మిథనాల్/వాటర్ (5/5/90, v/v)ని ఉపయోగించి ఐసోక్రటిక్ మోడ్‌తో dC18 అట్లాంటిస్ 3.5 μm, (100 mm × 2.1 mm id) కాలమ్‌లో విశ్లేషణలను వేరు చేయడం జరిగింది.రన్ టైమ్ 6.2 నిమిషాలకు మించలేదు.ప్రతికూల అయాన్ మోడ్‌లో ఎలక్ట్రోస్ప్రే ఇంటర్‌ఫేస్‌లో విశ్లేషణలు అయనీకరణం చేయబడ్డాయి.మేము సమ్మేళనాల ప్రకారం 2.5–150 ng mL −1 పరిధిలో పద్ధతిని ధృవీకరించాము.ఏడు రోజులలో ఇంట్రా మరియు ఇంటర్-అస్సే వేరియబిలిటీ 10% కంటే తక్కువగా ఉంది.నమూనాలను కనీసం రెండు వారాల పాటు −20 °C వద్ద నిల్వ చేసినప్పుడు మరియు మూడు ఫ్రీజ్-థా చక్రాల తర్వాత అన్ని సమ్మేళనాలు కణాలలో లేదా సంస్కృతి మాధ్యమంలో స్థిరంగా ఉంటాయి.రెండు మాధ్యమాలలో మాతృక ప్రభావం గమనించబడలేదు.