ఉత్పత్తులు

కొలిసిన్ E1 ఛానల్ డొమైన్ యొక్క మెమ్బ్రేన్ టోపోలాజీని ఫ్లోరోసెన్స్ రెసొనెన్స్ ఎనర్జీ ట్రాన్స్‌ఫర్ (FRET) ద్వారా అధ్యయనం చేశారు.FRET దాతగా జన్యుపరంగా ఎన్‌కోడ్ చేయబడిన ఫ్లోరోసెంట్ అమైనో ఆమ్లం (కౌమరిన్) మరియు FRET అంగీకారంగా DABMI (4-(డైమెథైలామినో) ఫెనిలాజోఫెనిల్-4'-మాలిమైడ్)తో జతచేయబడిన ఎంపికగా లేబుల్ చేయబడిన సిస్టీన్ అవశేషాలను కలిగి ఉంది.ఫ్లోరోసెంట్ కొమారిన్ అవశేషాలు ఆర్తోగోనల్ tRNA/aminoacyl-tRNA సింథటేస్ జత ద్వారా ప్రోటీన్‌లో చేర్చబడ్డాయి, ఇది కొలిసిన్ ఛానల్ డొమైన్‌లోని ఏదైనా సైట్‌లో సెలెక్టివ్ ఇన్‌కార్పొరేషన్‌ను అనుమతించింది.ప్రతి రూపాంతరం కొమారిన్ ఇన్‌కార్పొరేషన్ కోసం స్టాప్ (TAG) మ్యుటేషన్ మరియు DABMI అటాచ్‌మెంట్ కోసం సిస్టీన్ (TGT) మ్యుటేషన్‌ను కలిగి ఉంది.కరిగే మరియు మెమ్బ్రేన్-బౌండ్ స్టేట్స్ రెండింటికీ FRET విశ్లేషణను ఉపయోగించి హెలిక్స్ 1-6 లోపల ఆరు ఇంటర్‌హెలికల్ దూరాలు నిర్ణయించబడ్డాయి.ఛానల్ డొమైన్ యొక్క మెమ్బ్రేన్-బౌండ్ స్ట్రక్చర్‌పై కొత్త అంతర్దృష్టిని అందించే మెమ్బ్రేన్ అసోసియేషన్‌పై హెలిక్స్ 3-6 మధ్య ఇంటర్‌హెలికల్ దూరాలలో FRET డేటా పెద్ద మార్పులను చూపించింది.సాధారణంగా, కొలిసిన్ ఛానల్ కోసం గొడుగు నమూనాపై ఆధారపడిన మెమ్బ్రేన్ బైండింగ్‌పై కమారిన్-DABMI FRET ఇంటర్‌హెలికల్ సామర్థ్యాలు తగ్గాయి.ఛానెల్ డొమైన్ యొక్క క్లోజ్డ్ స్టేట్ కోసం టెంటెటివ్ మోడల్ ప్రస్తుత మరియు గతంలో ప్రచురించిన FRET డేటా ఆధారంగా అభివృద్ధి చేయబడింది.హెలిక్స్ 8 మరియు 9 ద్వారా ఏర్పడిన సెంట్రల్ ట్రాన్స్‌మెంబ్రేన్ హెయిర్‌పిన్ చుట్టూ హెలిక్స్ 1, 6, 7 మరియు 10 యొక్క మెమ్బ్రేన్ ఇంటర్‌ఫేషియల్ అసోసియేషన్ మరియు హెలిస్‌ల నుండి సవ్యదిశలో హెలిక్స్ 1-7 యొక్క వృత్తాకార అమరికను మోడల్ సూచిస్తుంది.