ఉత్పత్తులు

మొత్తం-కణ ఆధారిత బయోకెటలిటిక్ ప్రక్రియల అభివృద్ధి మరియు ఆప్టిమైజేషన్ కోసం సూక్ష్మజీవుల హోస్ట్ యొక్క జీవక్రియను అర్థం చేసుకోవడం చాలా అవసరం, ఎందుకంటే ఇది ఉత్పత్తి సామర్థ్యాన్ని నిర్దేశిస్తుంది.హోస్ట్‌లో కోఫాక్టర్/కోసబ్‌స్ట్రేట్ పునరుత్పత్తి సామర్థ్యం ఎండోజెనస్ కారణంగా జీవక్రియ క్రియాశీల కణాలు ఉపయోగించబడే రెడాక్స్ బయోక్యాటాలిసిస్‌కు ఇది ప్రత్యేకంగా వర్తిస్తుంది.రీకాంబినెంట్ ఎస్చెరిచియా కోలిని ప్రోలిన్-4-హైడ్రాక్సిలేస్ (P4H) అధిక ఉత్పత్తి చేయడానికి ఉపయోగించబడింది, ఇది ఉచిత L-ప్రోలిన్ యొక్క హైడ్రాక్సిలేషన్‌ను ట్రాన్స్-4-హైడ్రాక్సీ-L-ప్రోలిన్‌గా a-ketoglutarate (a-KG)తో కోసబ్‌స్ట్రేట్‌గా ఉత్ప్రేరకపరిచే డయాక్సిజనేస్.ఈ మొత్తం-కణ బయోక్యాటలిస్ట్‌లో, సెంట్రల్ కార్బన్ జీవక్రియ అవసరమైన కాసబ్‌స్ట్రేట్ a-KGని అందిస్తుంది, P4H బయోకెటలిటిక్ పనితీరును నేరుగా కార్బన్ జీవక్రియ మరియు జీవక్రియ కార్యకలాపాలకు కలుపుతుంది.మెటబాలిక్ ఇంజినీరింగ్ మరియు (13)C-మెటబాలిక్ ఫ్లక్స్ అనాలిసిస్ ((13)C-MFA) వంటి ప్రయోగాత్మక మరియు గణన జీవశాస్త్ర సాధనాలను వర్తింపజేయడం ద్వారా, మేము మొత్తం-సెల్ బయోక్యాటలిస్ట్ యొక్క శారీరక, జీవక్రియ మరియు బయోఎనర్జెటిక్ ప్రతిస్పందనను పరిశోధించాము మరియు పరిమాణాత్మకంగా వివరించాము. టార్గెటెడ్ బయోకన్వర్షన్‌కు మరియు మరింత హేతుబద్ధమైన పాత్‌వే ఇంజనీరింగ్ కోసం సాధ్యమయ్యే జీవక్రియ అడ్డంకులను గుర్తించింది.పుట్ఏ జీన్ ఎన్‌కోడింగ్ ప్రోలిన్ డీహైడ్రోజినేస్‌ను తొలగించడం ద్వారా ప్రోలైన్ డిగ్రేడేషన్-లోపం ఉన్న E. కోలి స్ట్రెయిన్ నిర్మించబడింది.ఈ ఉత్పరివర్తన జాతితో సంపూర్ణ-కణ జీవ రూపాంతరాలు పరిమాణాత్మక ప్రోలిన్ హైడ్రాక్సిలేషన్‌కు మాత్రమే కాకుండా, అడవి రకంతో పోలిస్తే నిర్దిష్ట ట్రాన్స్-4-ఎల్-హైడ్రాక్సీప్రోలిన్ (హైప్) నిర్మాణ రేటు రెట్టింపుకు దారితీశాయి.ఉత్పరివర్తన జాతి యొక్క సెంట్రల్ మెటబాలిజం ద్వారా కార్బన్ ఫ్లక్స్ యొక్క విశ్లేషణ, P4H కార్యాచరణకు పెరిగిన a-KG డిమాండ్ a-KG ఉత్పాదక ప్రవాహాన్ని మెరుగుపరచలేదని వెల్లడించింది, ఇది అధ్యయనం చేసిన పరిస్థితులలో కఠినంగా నియంత్రించబడిన TCA సైకిల్ ఆపరేషన్‌ను సూచిస్తుంది.అడవి రకం జాతిలో, P4H సంశ్లేషణ మరియు ఉత్ప్రేరకము బయోమాస్ దిగుబడిలో తగ్గుదలకు కారణమయ్యాయి.ఆసక్తికరంగా, ΔputA స్ట్రెయిన్ TCA కార్యాచరణను పెంచడానికి బదులుగా తక్కువ గ్లూకోజ్ తీసుకునే రేట్ల వద్ద నిర్వహణ శక్తి డిమాండ్‌లను తగ్గించడం ద్వారా అనుబంధిత ATP మరియు NADH నష్టాన్ని భర్తీ చేసింది. ఉత్పాదక P4H ఉత్ప్రేరకానికి బయో ట్రాన్స్‌ఫర్మేషన్ దిగుబడి పరంగా మాత్రమే కాకుండా, బయో ట్రాన్స్‌ఫర్మేషన్ మరియు ప్రోలైన్ అప్‌టేక్ మరియు ఎనర్జీ సోర్స్‌పై హైప్ యొక్క దిగుబడికి సంబంధించిన రేట్లు గురించి కూడా ఆశాజనకంగా ఉంటుంది.పుట్‌ఏ నాకౌట్‌పై, కాసబ్‌స్ట్రేట్ a-KG ద్వారా ప్రోలైన్ హైడ్రాక్సిలేషన్‌కు TCA-సైకిల్ కలపడం అనేది ఒక-KG-ఆధారిత బయో ట్రాన్స్‌ఫర్మేషన్‌ల సామర్థ్యాన్ని మరింతగా మెరుగుపరిచే కీలక కారకంగా మరియు లక్ష్యంగా మారుతుందని ఫలితాలు సూచిస్తున్నాయి.