ఉత్పత్తులు

యూకారియోటిక్ కణాలు నాలుగు డియోక్సిరిబోన్యూక్లియోసైడ్ ట్రిఫాస్ఫేట్‌ల (dNTPs) నిమిషాల మొత్తంలో సున్నితమైన బ్యాలెన్స్‌ను కలిగి ఉంటాయి, DNA ప్రతిరూపణకు కొన్ని నిమిషాలకు మాత్రమే సరిపోతుంది.ఒకే dNTP యొక్క లోపం మరియు మిగులు రెండూ ఉత్పరివర్తన రేట్లు, తప్పు DNA మరమ్మత్తు లేదా మైటోకాన్డ్రియల్ DNA క్షీణతకు దారితీయవచ్చు.dNTPలు సాధారణంగా ఎంజైమాటిక్ పరీక్ష ద్వారా లెక్కించబడతాయి, దీనిలో DNA పాలిమరేస్ ద్వారా రేడియోధార్మిక dATP (లేదా dATP కోసం విశ్లేషణలో రేడియోధార్మిక dTTP)ని నిర్దిష్ట సింథటిక్ ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్‌లలో చేర్చడం తెలియని dNTP యొక్క సాంద్రతకు అనులోమానుపాతంలో ఉంటుంది.సాధారణంగా ఉపయోగించే Klenow DNA పాలిమరేస్ తెలియని dNTPకి సంబంధిత రిబోన్యూక్లియోటైడ్‌ను ప్రత్యామ్నాయం చేయవచ్చని మేము కనుగొన్నాము, ఇది కొన్ని సందర్భాల్లో dNTPల యొక్క పెద్ద అంచనాకు దారి తీస్తుంది.మేము ఇప్పుడు రిబోన్యూక్లియోటైడ్ విలీనాన్ని నివారించే ప్రతి dNTP కోసం పరీక్షా పరిస్థితులను వివరిస్తాము.dTTP మరియు dATP పరీక్షలకు ఇది Klenow ఎంజైమ్ మరియు లేబుల్ చేయబడిన dATP (లేదా dTTP) యొక్క సాంద్రతలను తగ్గించడానికి సరిపోతుంది;dCTP మరియు dGTP కోసం మేము t he Klenow ఎంజైమ్‌ను Taq DNA పాలిమరేస్ లేదా థర్మో సీక్వెనేస్‌తో భర్తీ చేయాలి.కొన్ని మునుపటి నివేదికలలో రిబోన్యూక్లియోటైడ్ విలీనం dGTP మరియు dCTP లకు చాలా ఎక్కువ విలువలను కలిగించి ఉండవచ్చని మేము సూచిస్తున్నాము.