ఉత్పత్తులు

మానవ గట్ సింబాయింట్‌లో ఆల్ఫా-మన్నోసిడేస్‌ల Ca2+-ఆధారిత కుటుంబంలో యాంత్రిక అంతర్దృష్టులు.

Bacteroides thetaiotaomicron ద్వారా ఉదహరించబడిన పెద్దప్రేగు బాక్టీరియా, గ్లైకోసైడ్ హైడ్రోలేసెస్ (GHs) యొక్క పెద్ద కుటుంబాలను ఉపయోగించడం ద్వారా ఆహారపు పాలిసాకరైడ్‌లు మరియు హోస్ట్ గ్లైకాన్‌లను పోషకాలుగా ఉపయోగించుకోవడం ద్వారా మానవ ఆరోగ్యాన్ని కాపాడుకోవడంలో కీలక పాత్ర పోషిస్తుంది.అటువంటి GH కుటుంబ విస్తరణ B. thetaiotaomicron జన్యువుచే ఎన్కోడ్ చేయబడిన 23 కుటుంబ GH92 గ్లైకోసిడేస్‌లచే ఉదహరించబడింది.హోస్ట్ N-గ్లైకాన్‌లను ఉపయోగించుకోవడానికి ఒకే డిస్‌ప్లేస్‌మెంట్ మెకానిజం ద్వారా పనిచేసే ఆల్ఫా-మన్నోసిడేస్‌లు అని ఇక్కడ మేము చూపిస్తాము.రెండు GH92 మన్నోసిడేస్‌ల యొక్క త్రిమితీయ నిర్మాణం రెండు-డొమైన్ ప్రోటీన్‌ల కుటుంబాన్ని నిర్వచిస్తుంది, దీనిలో ఉత్ప్రేరక కేంద్రం డొమైన్ ఇంటర్‌ఫేస్‌లో ఉంది, ఇది Ca(2+)లో జలవిశ్లేషణకు యాసిడ్ (గ్లుటామేట్) మరియు బేస్ (అస్పార్టేట్) సహాయాన్ని అందిస్తుంది- ఆధారపడిన పద్ధతి.నిరోధకాలతో సంక్లిష్టంగా ఉన్న GH92ల యొక్క త్రిమితీయ నిర్మాణాలు ఉత్ప్రేరకము యొక్క విశిష్టత, మెకానిజం మరియు కన్ఫర్మేషనల్ ఇటినెరరీపై అంతర్దృష్టిని అందిస్తాయి.మన్నోసైడ్‌ను దాని గ్రౌండ్-స్టేట్ (4)C(1) కుర్చీ కన్ఫర్మేషన్ నుండి పరివర్తన స్థితికి వక్రీకరించడంలో సహాయపడటంలో Ca(2+) కీలకమైన ఉత్ప్రేరక పాత్రను పోషిస్తుంది. (బిబ్లియోగ్రఫీ: Nat.రసాయనంబయోల్.6, 125-32, (2010)

కాంకనావలిన్ A-సెఫరోస్ కాలమ్‌పై ఓవల్‌బుమిన్ గ్లైకోస్‌పరాగిన్స్ యొక్క ఫ్రంటల్ అఫినిటీ క్రోమాటోగ్రఫీ.లెక్టిన్ యొక్క బైండింగ్ విశిష్టత యొక్క పరిమాణాత్మక అధ్యయనం.

ఓవల్‌బుమిన్ నుండి తీసుకోబడిన 10 గ్లైకోస్‌పరాజైన్‌లతో సెఫరోస్ 4B-ఇమ్మొబిలైజ్డ్ కాంకనావలిన్ A (ConA) యొక్క పరస్పర చర్యలు ఫ్రంటల్ అఫినిటీ క్రోమాటోగ్రఫీ ద్వారా పరిమాణాత్మకంగా పరిశోధించబడ్డాయి.ఈ పద్ధతిలో, ఒక కార్బోహైడ్రేట్ ద్రావణం ఒక ConA-Sepharose కాలమ్‌కు నిరంతరం వర్తించబడుతుంది మరియు ఎలుషన్ ఫ్రంట్ యొక్క రిటార్డేషన్ పరస్పర చర్య యొక్క బలం యొక్క పరామితిగా కొలుస్తారు.ConAతో ఉన్న ప్రతి శాకరైడ్‌కు డిస్సోసియేషన్ స్థిరాంకం (Kd) నిర్ణయించబడుతుంది.p-nitrophenyl-alpha,D-mannoside యొక్క బైండింగ్ యొక్క విశ్లేషణ, సెఫరోస్ 4Bపై స్థిరీకరణ తర్వాత ConA యొక్క బైండింగ్ లక్షణాలు తప్పనిసరిగా మారవని చూపించింది.విశ్లేషణ కోసం రిడక్టివ్ మిథైలేషన్ పద్ధతి ద్వారా ప్రతి ఓవల్‌బుమిన్ గ్లైకోస్‌పరాజైన్‌లు ట్రిటియంతో లేబుల్ చేయబడ్డాయి.పొందిన Kd విలువల పోలిక గ్లైకోసైల్ చైన్ యొక్క అతి స్వల్ప నిర్మాణ వ్యత్యాసాలతో ConA యొక్క బైండింగ్ గణనీయంగా మారుతుందని చూపించింది.C-6-లింక్డ్ మన్నోస్ యొక్క C-3 స్థానం వద్ద కనీసం ఒక హైడ్రాక్సిల్ సమూహం ఉచితంగా ఉండాలని, మ్యాన్ ఆల్ఫా 1-6(మ్యాన్ ఆల్ఫా 1-3)మ్యాన్ అనే నిర్దిష్ట గ్లైకోసిల్ చైన్ నిర్మాణాన్ని ConA గుర్తిస్తుందని ఫలితాలు సూచిస్తున్నాయి.